效劳热线
产品说明
本产品包括种种酶法组织消化中常用的胶原酶等卵白酶,,,,,,,,能特异性地降解胞外胶原卵白,,,,,,,,使胶原卵白和纤维粘连卵白的网状结构解离,,,,,,,,而不损坏细胞外貌结构的完整性。。。。。。。。使用本产品举行组织消化可以使组织中细胞间的桥连结构松动,,,,,,,,使组织由块状酿成絮状,,,,,,,,经由机械奏乐后制成少量细胞群团和大宗单个细胞的细胞悬液。。。。。。。。制备的细胞悬液可用于原代作育、流式细胞仪举行细胞生物学(如凋亡、增殖、细胞周期等)研究。。。。。。。。适用规模:种种正常乳腺和乳腺肿瘤组织,,,,,,,,从中疏散获得原代细胞,,,,,,,,包括上皮细胞,,,,,,,,间质细胞,,,,,,,,成纤维细胞等。。。。。。。。
使用说明
-20℃避光生涯6个月内有用。。。。。。。。
(1)提前将消化酶从-20℃冰箱取出置于2-8℃融化;;;;;;
(2)将冰盒外貌消毒后移入超净台内。。。。。。。。在无菌条件下,,,,,,,,冰上在作育皿中将组织样本置于组织洗濯液内洗濯3~5 s。。。。。。。。
(3)在无菌条件下,,,,,,,,将洗濯后的组织样本浸没在盛有10 ml组织洗濯液的作育皿中。。。。。。。。冰上接纳无菌手术刀将样本机械切割成1~2 mm3巨细后,,,,,,,,将样品碎块转移至50 mL无菌离心管中;;;;;;
(4)加入10~20 mL组织洗濯液于离心管中,,,,,,,,1200 rpm 4℃离心5 min;;;;;;
(5)弃上清,,,,,,,,加入10~30 mL本消化酶(消化酶体积至少为组织体积的5倍),,,,,,,,标记样本名称及编号并用封口膜封口,,,,,,,,放入恒温振荡作育箱中消化,,,,,,,,设置参数37 ℃、100~200 rpm(凭证样实质地设置转速),,,,,,,,待组织消化至泛起团絮状(一样平常1小时左右),,,,,,,,即可终止消化;;;;;;
(6)取出消化好的样本,,,,,,,,加入5 mL含血清DMEM作育基,,,,,,,,100 μm细胞筛网过滤。。。。。。。。
(7)将过筛后的细胞悬液于350 g常温离心5 min。。。。。。。。
(8)弃上清后,,,,,,,,细胞沉淀加入原代细胞作育基待用。。。。。。。。
注重事项
1. 本产品通例在-20℃生涯。。。。。。。。使用前需在2-8℃融化,,,,,,,,融化后需在一周内使用完毕。。。。。。。。
2. 使用本产品时应注重无菌操作,,,,,,,,阻止污染。。。。。。。。
3. 为坚持本产品的最佳使用效果,,,,,,,,一样平常在37℃条件下使用,,,,,,,,凭证详细实验情形也可在2-8℃条件下使用。。。。。。。。
4. 本产品的消化时间需要凭证样品巨细举行探索,,,,,,,,关于珍贵样品,,,,,,,,为抵达最佳的疏散效果,,,,,,,,可接纳二次分步消化方法(即将首次消化的组织残渣网络后,,,,,,,,重复如上操作办法1~8)。。。。。。。。
5. 请于保质期内使用本产品,,,,,,,,凌驾保质期后,,,,,,,,将无法抵达理想的使用效果。。。。。。。。
6. 本产品仅用于科研用途,,,,,,,,不可用于体外诊断。。。。。。。。
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